近年來，深入解析髓系細(xì)胞尤其是單核-巨噬細(xì)胞在腫瘤微環(huán)境（TME）中的免疫調(diào)控作用，并在此基礎(chǔ)上探索免疫治療的潛力，已成為一個(gè)研究熱點(diǎn)方向。這期就讓我們跟著CSF-1R抗體的頂刊文獻(xiàn)來學(xué)習(xí)相關(guān)的前沿進(jìn)展。

TME中巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的過繼性T細(xì)胞清除

為了克服這一挑戰(zhàn)，作者在過繼性T細(xì)胞中表達(dá)工程化改造的CD47變體CD47（Q31P），維持與SIRPα結(jié)合的同時(shí)不被CD47抗體阻斷，在與CD47抗體聯(lián)用時(shí)協(xié)同增強(qiáng)抗腫瘤效應(yīng)。

在上篇中我們提到過小分子抑制劑和單抗是兩類常用的CSF-1R抑制劑，這項(xiàng)研究結(jié)合了兩者來清除小鼠體內(nèi)的巨噬細(xì)胞。預(yù)處理時(shí)靜脈注射200μl氯膦酸脂質(zhì)體加腹腔注射400μg CSF-1R抗體，實(shí)驗(yàn)期間再每周三次給藥400μg CSF-1R抗體，流式分析驗(yàn)證CD11b+/F4/80+巨噬細(xì)胞清除。

除了TME中的免疫抑制性單核來源巨噬細(xì)胞（mo-mac），腫瘤還能增強(qiáng)髓系造血不斷補(bǔ)充這些細(xì)胞。為了解決這一“源頭"問題，9月最新的Nature研究對(duì)NSCLC臨床樣本和模型小鼠進(jìn)行了單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組與染色質(zhì)可及性的聯(lián)合分析，鑒定到腫瘤誘導(dǎo)骨髓中髓系祖細(xì)胞表觀遺傳重編程的關(guān)鍵因子Nfe2l2（NRF2）。基因敲除或使用藥物抑制NRF2能夠顯著降低TME中mo-mac的存活與免疫抑制作用，恢復(fù)NK細(xì)胞和T細(xì)胞的抗腫瘤免疫功能，增強(qiáng)免疫檢查點(diǎn)抑制劑的療效[2]。

在肺癌（KrasLSL-G12D/+;Trp53fl/fl）小鼠模型中，隔天注射400μg Bio X Cell的CSF-1R抗體清除單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，NRF2正常的對(duì)照組中腫瘤負(fù)荷顯著降低，而NRF2缺陷小鼠（Nfe2l2ΔMs4a3）沒有明顯的附加效應(yīng)，表明NRF2激活后是通過mo-mac介導(dǎo)免疫抑制。

8月的一篇Cancer Cell論文嘗試從TME角度破解復(fù)發(fā)/難治性侵襲性B細(xì)胞淋巴瘤（B-NHL）的CAR-T耐藥問題，采用單細(xì)胞測序、成像質(zhì)譜流式、MACSima成像循環(huán)染色等多種高維技術(shù)分析臨床樣本，系統(tǒng)比較了持續(xù)應(yīng)答和非持續(xù)應(yīng)答病人治療前后的細(xì)胞樣本，鑒定到與預(yù)后相關(guān)的CSF-1R+CD14+CD68+淋巴瘤相關(guān)髓系-單核（lympohma-associated myeloid-monocytic，LAMM）細(xì)胞，能夠抑制CAR-T細(xì)胞的增殖與殺傷功能[3]。

在具備完-全免疫功能的原發(fā)性DLBCL小鼠模型中，CD19 CAR-T細(xì)胞與CSF-1R抗體聯(lián)用產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)。具體方案為從CAR-T細(xì)胞回輸前2天開始腹腔注射Bio X Cell的CSF-1R抗體，每劑400μg（相當(dāng)于16mg/kg體重），每周三次，直至CAR-T回輸后28天，在轉(zhuǎn)錄和蛋白水平上均驗(yàn)證LAMM有效清除。CSF-1R抗體聯(lián)用相比CAR-T單藥治療，顯著改善PFS，并提高了持續(xù)CR的小鼠數(shù)量，大大延長OS。

盡管取得了一些積極的結(jié)果，CSF-1R抑制劑的臨床應(yīng)用并非一帆風(fēng)順，比如其對(duì)于轉(zhuǎn)移性去勢抵抗性前列腺癌（mCRPC）的抗腫瘤活性就有限。今年初的一項(xiàng)Nature研究應(yīng)用單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測序在病人活檢樣本和同源小鼠模型中共同鑒定到一類新型免疫抑制性巨噬細(xì)胞亞群SPP1hi-TAM，高表達(dá)Spp1低表達(dá)Csf1r，解釋了CSF-1R抑制劑療效不理想的原因[4]。

為確定SPP1hi-TAM是否耐受CSF-1R阻斷，當(dāng)小鼠發(fā)展為CRPC（腫瘤體積達(dá)100–200mm3）時(shí)隨機(jī)分為兩組，分別腹腔注射1mg Bio X Cell的小鼠CSF-1R抗體或?qū)?yīng)的同型對(duì)照抗體，5天后給予0.5mg抗體（溶于200μl PBS）維持，2天后流式分析的結(jié)果表明SPP1hi-TAM對(duì)CSF-1R阻斷不敏感。

進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)SPP1hi-TAM介導(dǎo)免疫治療耐藥可能是通過腺苷信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。使用ciforadenant抑制腺苷A2A受體，聯(lián)合阿特珠單抗（atezolizumab）阻斷PD-L1，可在mCRPC患者中誘導(dǎo)臨床反應(yīng)。

這些應(yīng)用Bio X Cell CSF-1R抗體獲得的新發(fā)現(xiàn)讓我們愈發(fā)感受到TME調(diào)控腫瘤免疫的重要性，無論是免疫檢查點(diǎn)抑制劑還是過繼性細(xì)胞治療，解除TME中的免疫抑制都能與之有效協(xié)同。而Bio X Cell則為研究者提供可靠的功能級(jí)抗體，助力進(jìn)一步探索髓系細(xì)胞異質(zhì)性，見證科學(xué)突破。